針對(duì)不同降解程度，方法不同，?核心原則是：能重新提取就優(yōu)先重新提取，無(wú)法重新提取再選富集補(bǔ)救?，具體方案如下：

1. 絕大多數(shù)情況（可獲取新鮮組織）：重新規(guī)范提取+分裝凍存，是的方法

因?yàn)橐呀?jīng)降解的蛋白無(wú)法復(fù)原，哪怕富集也只能得到部分完整靶標(biāo)，重新提取能從源頭避免降解，只要操作規(guī)范就能得到穩(wěn)定的靶標(biāo)，這是最的解決方法，具體操作只要抓住2個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)：

全程冰上操作，裂解液加足量蛋白酶抑制劑，提取后立即用膜蛋白試劑盒富集ACA11；

按單次實(shí)驗(yàn)用量分裝成小份，-80℃凍存，避免反復(fù)凍融。

2. 無(wú)法重新取材（僅輕度-中度降解）：?膜片段靶標(biāo)富集法?

相比補(bǔ)加蛋白酶抑制劑、增加上樣量，膜片段富集能特異性回收100~120kDa區(qū)間的完整ACA11，去除降解產(chǎn)生的小片段雜蛋白，有效信號(hào)提升更明顯：

它能把完整靶標(biāo)的濃度提升2~3倍，比單純?cè)黾由蠘恿康男旁氡雀撸尘案停?/p>

只要樣本仍有少量完整ACA11殘留，大概率能檢出清晰的目標(biāo)條帶，補(bǔ)救成功率能達(dá)到60%~70%，遠(yuǎn)高于其他補(bǔ)救方法。

3. 重度降解：任何補(bǔ)救方法都無(wú)效，必須重新提取

如果內(nèi)參已經(jīng)彌散或無(wú)條帶，說明絕大多數(shù)蛋白已經(jīng)降解，哪怕富集也得不到有效靶標(biāo)，不用嘗試其他方法，直接重新取材更節(jié)省時(shí)間。